Theo chị Nguyễn Minh Hiếu - con gái của NSƯT Khôi Nguyên thì nam nghệ sĩ phát hiện mình bị ung thư cách đây 2 tháng. Khi đó NSƯT Khôi Nguyên bị ho kéo dài, uống thuốc không khỏi, sốt cao nên gia đình cho đi kiểm tra. Hiện tại, sức khỏe của ông không được tốt và đang được gia đình chăm sóc tại nhà riêng.

Trước đó, ông không có dấu hiệu bất thường về sức khỏe. Dù mang bệnh nặng nhưng NSƯT Khôi Nguyên vẫn giữ tinh thần lạc quan, thoải mái. Ông vui vì luôn có gia đình, người thân và khán giả quan tâm, lo lắng.

NSƯT Khôi Nguyên có tất cả 3 người con (2 gái, 1 trai) đều thành đạt. Ông có một cuộc sống hạnh phúc viên mãn bên người vợ luôn ủng hộ ông trong sự nghiệp và sẵn làm hậu phương để ông “toàn tâm toàn ý” cho nghệ thuật. Ở tuổi xế chiều, ông bà vẫn thường xuyên đưa nhau đi du lịch đó đây để bù lại những tháng năm vất vả của tuổi trẻ. NSƯT Khôi Nguyên là một người rất yêu đời. Ông thường xuyên làm thơ tặng vợ, bạn bè, ca ngợi cuộc đời… rồi đăng tải trên mạng xã hội để giao lưu với bạn bè.

Sinh năm 1943, ông vào nghề từ năm 1959, lúc mới 16 tuổi và đầu quân cho sân khấu cải lương. Ngày ấy, sân khấu cải lương vẫn còn được nhiều khán giả đón nhận. Ông và những nghệ sĩ cùng thời đã sống bằng những đam mê từ trái tim, để làm nên nhiều vở diễn có tiếng vang ngày ấy.

Công tác ở Nhà hát Sân khấu Cải lương một thời gian, NSƯT Khôi Nguyên chuyển sang quản lý. Ông có thời gian 4 năm đi giảng dạy tại khoa Kịch hát Dân tộc - ĐH Sân khấu Điện ảnh. Trong thời gian công tác tại Nhà hát Sân khấu Cải lương, ông đã được phong danh hiệu NSƯT năm 1992.

5 tập phim “Bác Cả người sung sướng” của đạo diễn Trần Lực được sản xuất và phát sóng năm 2002. Ngay sau khi ra mắt, phim đã nhận được phản hồi tích cực từ phía người xem và tạo nên “cơn sốt” trên sóng màn ảnh nhỏ. Đảm nhận vai chính trong bộ phim này là NSƯT Khôi Nguyên và nhân vật mà ông hóa thân đã để lại dấu ấn sâu đậm trong lòng khán giả. Vai Bác Cả cũng là vai chính đầu tiên của nam diễn viên gạo cội khi bén duyên với phim truyền hình.

Sau vai diễn đầu tay này, NSƯT Khôi Nguyên tham gia diễn xuất trong nhiều bộ phim truyền hình khác như: "Cựu chiến binh", "Bí thư tỉnh ủy", "Chạy án", "Tình yêu không hẹn trước"… Sau khi lấn sân sang đóng phim truyền hình, ông thường được “đóng đinh” với những vai chính diện, các mẫu nhân vật có tính cách thẳng thắn, sống vì mọi người nhưng mang tiếng “vác tù và hàng tổng”.